Human Calcitonin Gene Related Peptide 1 / CGRP1 (C

预包被 96 孔微孔板

标准

标准稀释缓冲液

洗涤缓冲液

检测试剂 A

检测试剂 B

稀释剂 A

稀释剂 B

TMB 底物

停止解决方案

封板机

37°C 培养箱

多通道和单通道移液器以及无菌移液器吸头

喷瓶或自动洗板机

1.5 毫升管

蒸馏水

吸收性滤纸

100 ml 和 1 L 量筒

酶标仪（波长：450 nm）

ELISA 摇床

血清：样品应收集到血清分离管中。将试管垂直放置，在 4°C 或室温下放置长达 60 分钟，使其保持原样，以凝固血清。以大约 1000 × g 离心 20 分钟。立即或分装分析血清并储存在 -20°C 或 -80°C 下。

血浆：使用肝素或 EDTA 作为抗凝剂收集血浆。收集后 30 分钟内以 1000 × g 离心 15 分钟。立即检测或分装并储存在 -20°C 或 -80°C 下。 避免溶血和高胆固醇样本。

组织匀浆：组织匀浆的制备会因组织类型而异——这只是一个例子。用冰冷的 PBS 冲洗组织以去除多余的血液。均质化前称重。将组织切碎，用组织匀浆器在 PBS 中的冰上匀浆，然后对细胞悬液进行超声处理。将匀浆以 5000 × g 离心 5 分钟并收集上清液。立即测定或分装并储存在 -20°C 下。

1） 标准品：用推荐体积的标准稀释剂缓冲液制备标准品，制成标准溶液。然后按照方案中的说明，使用标准稀释剂缓冲液对标准溶液进行连续稀释。

2） 洗涤缓冲液：按照实验步骤中的说明，用蒸馏水稀释浓缩的洗涤缓冲液。

3） 检测试剂制备：计算所需工作溶液的总体积。分别用稀释剂 A 和稀释剂 B 以 1：100 的比例稀释检测试剂 A 和检测试剂 B。

1） 设定标准、测试样品和对照孔。

2） 将 100 μl 稀释的标准品分装到标准孔中。

3） 将 100 μl 标准稀释液缓冲液分装到对照（零）孔中。

4） 将 100 μl 稀释样品分装到样品孔中。在 37 °C 下孵育 1 小时。

5） 将 100 μl 检测试剂 A 分装到每个孔中。在 37 °C 下孵育 1 小时。

6） 洗涤 3 次。

7） 将 100 μl 检测试剂 B 分装到每个孔中。在 37 °C 下孵育 90 分钟。

8） 洗涤 5 次。

9） 将 90 μl TMB 底物分装到每个孔中。在 37 °C 下孵育 10-20 分钟。

10） 分装 50 μl 终止液。

11） 测量 450 nm 处的 OD。