核酸凝胶染料应该如何进行选择？

SPEED Biosystems 拥有一系列核酸凝胶染料，包括用于凝胶前和凝胶后染色的 GreenView™、GreenView™ Plus、GreenView™ Ultra 和 RedView™，以及用于电泳前与核酸混合的 SafeGreen™ 和 SafeRed™ 上样染料。这些染料是下一代荧光核酸凝胶染料，旨在替代高致突变性溴化乙锭 （EB）。这些染料兼具高灵敏度、低毒性和高稳定性，优于 EB。EB 因其成本低且通常具有足够的灵敏度而被广泛用于核酸凝胶染色。然而，EB 具有高度诱变性。与净化和废物处理相关的安全隐患和成本最终会使染料变得昂贵且使用不便。

用于凝胶前和凝胶后染色的凝胶染料（GreenView™、GreenView™ Plus、GreenView™ Ultra 和 RedView™）

优势

★ 比 EB 更安全。Ames 试验和其他试验显示无突变性和无细胞毒性。

★ 常温下稳定。

★ 与标准蓝光 LED 和 UV 透射仪兼容。

★ 与蓝光一起使用可减少凝胶切除和后续克隆的诱变。

图 1.使用 GreenView™、GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 的凝胶染色结果（左图），以及使用 SYBR Safe™ 和 GelGreen™ 的比较结果（右图）。左图：将 1 kb DNA 分子量标准（NEB，货号 # N0468S）的两倍梯度稀释液以 25 ng、50 ng 和 100 ng（从左到右）的量分分 3 个泳道上加载到每块凝胶上，然后用 GreenView™、GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 进行后染色。右图：结果显示 GreenView™ 与 SYBR Safe™ 和 GelGreen™ 具有相似的灵敏度，GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 的灵敏度要好得多。

图 2.使用 RedView™ 和 GelRed™ 进行凝胶染色结果。将 1 kb DNA 分子量标准品的 2 倍梯度稀释液以 25 ng、50 ng 和 100 ng（从左到右）的量分装到 3 个泳道的每块凝胶上，然后分别用 RedView™ 和 GelRed™ 进行后染色。结果显示 RedView™ 与 GelRed™ 具有相似的灵敏度。

除了比 EB 更安全之外，与 SYBR Safe DNA 凝胶染料相比，GreenView™、GreenView™ Plus 和 RedView™ 的细胞通透性降低，使其更安全（图 3）。

图 3.使用 SYBR Safe、GreenView、GreenView Plus 和 RedView 进行细胞通透性测试。Hela 细胞在 37？使用 1X SYBR Safe、GreenView、GreenView Plus 和 RedView 30 分钟。

GreenView Plus 和 RedView 无法穿透细胞膜以结合活细胞中的 DNA，并且比 SYBR Safe 安全得多，后者可快速进入细胞并对细胞核进行染色。

如何选择适合您的 DNA 染色剂？

凝胶上样染料（SafeGreen™ 和 SafeRed™）

优势

★ 在 6X 上样缓冲液中配制，即用型。

★ 安全无毒，是 EB 的替代品。

图 4.使用 SafeGreen™（左图）和 SafeRed™（右）与 DNA 分子量标准预混合的凝胶染色结果。

SafeGreen™ 和 SafeRed™ 经过专门设计，不渗透细胞膜，从而通过防止染料进入活细胞来降低遗传毒性（图 5）

图 5.使用 SYBR Safe™、SafeGreen™ 和 SafeRed™ 进行细胞通透性检测。将 Hela 细胞在 37oC 下与 1X SYBR Safe™、SafeGreen™ 和 SafeRed™ 一起孵育 30 分钟。SafeGreen™ 和 SafeRed™ 无法穿透细胞膜结合活细胞中的 DNA，比 SYBR Safe™ 安全得多，后者可快速进入细胞并对细胞核进行染色。

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