celltechgen:免疫测定试剂和试剂盒描述

celltechgen:免疫测定试剂和试剂盒——用于流式细胞术的大鼠 CLCN6 珠基检测套装

货号：CTG-BAR1133

试剂盒成分

2 ml 针对大鼠 CLCN6 的单克隆抗体，R-PE 缀合。

2 ml 抗 R-PE 磁珠。

1 ml 微珠释放试剂和 1 ml 终止缓冲液

10 毫升稀释缓冲液。

该试剂盒旨在使用磁珠磁性标记来分离和检测大鼠 CLCN6 ⁺细胞。首先，用与R-PE和抗R-PE磁珠缀合的大鼠CLCN6单克隆抗体标记细胞，在磁力柱上阳性选择大鼠CLCN6 ⁺细胞，收集用于进一步流式细胞术分析。磁珠释放试剂和终止缓冲液可用于将带有抗体-R-PE 的细胞从磁珠中释放出来。

目标特征

符号：大鼠 CLCN6

基因ID：295586

Uniprot 条目：D4A3H5

蛋白质名称： 氯转运蛋白 6       

生物体：褐家鼠（大鼠）

容量        

1 X 10 ⁹单元

公式  

所有组分均以含有稳定剂和 0.05% 叠氮hua钠的缓冲液形式提供。

储存与使用      

避光保存在 2?8 ^o C 下。不要冷冻。有效期标注在小瓶标签上。该产品仅供研究，不可用于诊断程序。

通用协议

检测试剂盒用于分离和检测具有特定抗原的靶细胞。筛选过程是用针对特定抗原的单克隆抗体直接对细胞进行磁性标记，并与 R-PE 和 Anti-R-PE 磁珠缀合，然后将标记的细胞保留在磁柱上，然后将目标细胞筛选出来。被释放并收集以进行进一步的流式细胞术分析。

1. 样品制备

• 当使用抗凝外周血或血沉棕黄层时，应通过密度梯度离心分离外周血单核细胞 (PBMC)。

• ^{要在密度梯度分离后去除血小板，请将细胞沉淀重悬于缓冲液中，并在 20 o} C下以 200 x g 离心 10?15 分钟。小心吸出上清液。重复洗涤步骤。

• 当处理组织或溶解的血液时，使用标准方法制备单细胞悬浮液。

• 死细胞可能会非特异性地与磁珠结合。要去除死细胞，我们建议使用密度梯度离心或死细胞去除试剂盒。

• 保持细胞低温，并使用预冷的溶液。

2. 磁性标签

• 下面给出的磁性标记体积最多适用于 10 ⁷个细胞。当使用少于 10 ^{7 个}细胞时，请使用所示的相同体积。当使用更高的细胞数量时，请相应地扩大所有试剂体积和总体积。

• 应滴定一抗染料偶联抗体以确定最佳染色稀释度。染色不应增加阴性群体的荧光强度。

1)    计算细胞数量。

2)     300×g离心细胞悬液10分钟。全吸出上清液。

3)每 10    ^{7 个}总细胞 在 80 µL 缓冲液中重悬细胞沉淀。

4)    加入 20 µl PE 偶联一抗，充分混匀，并在 2?8 ^o C下避光孵育 10 分钟。

5)每 10    ^{7 个}细胞 添加 1?2 mL 缓冲液，洗涤细胞以去除未结合的一抗，并在 300×g 下离心 10 分钟。

6)全吸出上清液，并在每 10    ^{7 个}总细胞 80 µL 缓冲液中重悬细胞。

7)每 10    ^{7 个}总细胞 添加 20 µL 抗 PE 磁珠。

^{8) 充分混合并在 2?8 o} C下孵育 15 分钟。

^{9) 每10 7 个}细胞加入1~2 mL缓冲液洗涤细胞，300×g离心10分钟，全吸出上清。

10)在 500 µL 缓冲液中重悬最多 10 ^{7 个}细胞。注意：对于更高的细胞数量，请相应地增加缓冲液体积。

11) 进行磁分离。

3. 检测目的细胞的正选

1) 将色谱柱置于合适的分离器的磁场中。 

2) 用适量的缓冲液冲洗来准备柱。

3) 将细胞悬液涂在柱上。

4) 收集通过的未标记细胞，并用适量缓冲液洗涤柱。执行洗涤步骤三次。          

5) 从分离器中取出柱并将其放置在合适的收集管上。

6) 将适量的缓冲液移至柱上并释放靶细胞以进行进一步的流式细胞分析。

Celltechgen 实验室是一家先进的医学检测实验室服务，提供用于疾病和健康状况的诊断、筛查或评估的全套检测。产品覆盖生化产品、蛋白质、抗体、肽、小分子、标记探针染料和试剂盒产品组合，为生命科学研究人员提供了用于生物标志物目标识别/验证、大容量筛选分析、基因表达分析、核酸检测、蛋白质生物化学和检测的工具，以及细胞和免疫学分析。