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贴壁细胞的有效传代培养需要将它们从培养容器中分离出来。采用多种方法，每种方法适合不同的细胞类型和条件。选择解离方法时，考虑细胞系的具体需求和实验目标至关重要。定期监测细胞活力，目标是在传代培养时细胞活力超过 90%，这对于培养物的持续健康和生产力至关重要。以下是这些过程的概述：
程序 | 解离剂 | 典型应用 |
机械抖落 | 通过摇动或移液轻轻或剧烈搅拌 | 用于松散贴壁或处于有丝分裂期的细胞。 |
机械刮削 | 物理工具，例如细胞刮刀 | 适用于蛋白酶敏感细胞，尽管它可能很苛刻并且具有潜在的破坏性。 |
酶处理 | 胰蛋白酶溶液 | 对于牢固粘附在培养容器上的细胞有效。 |
酶处理 | 胰蛋白酶+胶原酶 | 非常适合致密细胞培养或多层生长的细胞，特别是成纤维细胞。 |
酶处理 | 分散酶 | 可以去除完整片材中的表皮细胞，保持细胞间的连接。 |
酶处理 | TrypLE™ 酶 | 适用于牢固贴壁细胞的强解离选项，适用于需要非动物源试剂的实验方案。 |
酶处理 | Accutase | 胰蛋白酶的温和替代品，对多种细胞类型有效，包括干细胞和原代细胞。 |
酶处理 | 胰蛋白酶+EDTA | 用于通过螯合二价阳离子来增强细胞脱离、促进酶活性的组合。 |
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